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5-FOA 5-氟乳清酸 酵母反篩選劑 表達分析

5-FOA 5-氟乳清酸 酵母反篩選劑 表達分析

簡要描述:

5-FOA 5-氟乳清酸 酵母反篩選劑 表達分析 克隆與表達分析,用于酵母反選是一種常用的分子遺傳篩選方法。酵母菌質(zhì)粒清除、質(zhì)粒穿梭、等位置換和雙雜交篩選都會用到5-FOA。

產(chǎn)品時間:2024-03-28

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5-Fluoroorotic Acid (5-FOA) 5-氟乳清酸(酵母反篩選藥物)


【溫馨提示】:見我司懋康生物整理的酵母雙雜交檢測(Yeast two-hybrid assay)產(chǎn)品專題。


基本描述

5-氟乳清酸(5-Fluoroorotic Acid,5-FOA)用于酵母反選是一種常用的分子遺傳篩選方法。酵母菌質(zhì)粒清除、質(zhì)粒穿梭、等位置換和雙雜交篩選都會用到5-FOA。5-FOA自身對酵母細胞無毒,但功能型URA3基因能編碼表達乳清酸核苷-5′-單磷酸脫羧酶(OMP脫羧酶),將其轉(zhuǎn)化為有毒形式(如5-氟*),從而使得酵母細胞無法生長。篩選之后,表型Ura+的酵母菌變?yōu)?/span>Ura-和5-FOA(R)的酵母菌。


產(chǎn)品應(yīng)用:

1. 檢測酵母URA3基因表達;

2. 構(gòu)建酵母雙雜交文庫;

3. 其他酵母遺傳學領(lǐng)域包括基因替換,可移動遺傳因子分析和基因突變鑒定研究。


篩選對象:

Saccharomyces cerevisiae, Schizosaccharomyces pombe, and other fungi species containing URA3 orthologs.


產(chǎn)品特性:

1. 供貨形式:化學合成的5-FOA一水合物粉末或液體

2. 保存方法:-20oC

3. 分子式:C5H3FN2O4• H2O

4. 分子量:174.0

5. 純度:≥ 98%


產(chǎn)品應(yīng)用:

圖 1. 使用 5-FOA 反選酵母。測試了niao嘧啶 (ura3-1) 營養(yǎng)缺陷型酵母菌株在含有 5-FOA 的培養(yǎng)基上生長的能力。測試了三種菌株:單獨的野生型(YZ1)、帶有URA3標記的低拷貝質(zhì)粒的野生型(YZ2)以及刪除必需基因(△EG)且不能失去互補的URA3質(zhì)粒的突變菌株(YZ3)。

Fig 1. Counter selection of yeast using 5-FOA. Yeast strains that are auxotrophic for uracil (ura3-1) were tested for their ability to grow on 5-FOA containing media. Three strains were tested: wt alone (YZ1), wt with a URA3 marked low copy plasmid (YZ2), and a mutant strain with a deletion of an essential gene (△EG) that could not lose a complementing URA3 plasmid (YZ3).

.從左到右、從上到下分別是合成wan全葡萄糖培養(yǎng)基(SC): 1. SC,合成wan全無5FOA;2. 標準品 - SC-5-FOA(由超純 5-FOA 粉末制成的 SC-5-FOA,1 克/升) 3. 由 100X 5-FOA 溶液制成的 SC-5-FOA;4:SC-5-FOA 由 2X SC/5-FOA 制成。

.From left to right, top to bottom are synthetic complete glucose medium (SC): 1. SC, synthetic complete no 5FOA; 2. Standard - SC-5-FOA (SC-5-FOA made from ultra-pure 5-FOA powder, 1 g/liter) 3. SC-5-FOA made from 100X 5-FOA solution; 4: SC-5-FOA made from 2X SC/5-FOA.

對于每個板,上:酵母菌株:YZ1 野生型,Ura-(wt,ura-3-52),右:酵母菌株:YZ2,攜帶低拷貝的 wt,單獨的 URA3 質(zhì)粒,左:酵母菌株:YZ3 :△EG,含有互補質(zhì)粒(pRS316:EG、URA3、CEN)。對于所有含有 5-FOA 且沒有明顯 5-FOAR 菌落的培養(yǎng)基,針對菌株 YZ3 的反選擇是明顯的(參見左圖,YZ3:在板 2、3 和 4 中)。來自對照菌株 YZ1 和 YZ2 的細胞能夠在 5-FOA 培養(yǎng)基上生長。

For each plate, Top: Yeast strain: YZ1 wild-type, Ura- (wt, ura-3-52), Right: Yeast strain: YZ2, wt carrying a low copy, URA3 plasmid alone, and Left: Yeast strain: YZ3: △EG, containing the complementing plasmid (pRS316: EG, URA3, CEN). The counter selection against strain YZ3 was evident for all media containing 5-FOA with no 5-FOAR colonies evident (see left panels, YZ3: in plates 2, 3, and 4). Cells from control strains YZ1 and YZ2 were able to grow on 5-FOA media.


產(chǎn)品訂購:Zymo Research*,現(xiàn)貨供應(yīng),咨詢,:。

由于5-FOA水溶性較差,操作起來比較麻煩,還另提供DMSO儲存液(100 x)。

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另提供進口分裝的5-FOA,性價比更高,現(xiàn)貨供應(yīng),,:。

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5-Fluoroorotic Acid (5-FOA)  5-氟乳清酸

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5-Fluoroorotic Acid (5-FOA)  5-氟乳清酸

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1386

MF2522-500MG

5-Fluoroorotic acid monohydrate (5-FOA) 5-氟乳清酸一水合物

500mg

316

MF2522-1000MG

5-Fluoroorotic acid monohydrate (5-FOA) 5-氟乳清酸一水合物

1g

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注意事項:

1)為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。

2)本品僅用作科研用途,不能用作診斷和藥物。


— —Written/Edited by V. Shallan【版權(quán)歸MKBio懋康所有】


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5-FOA 5-氟乳清酸 酵母反篩選劑 表達分析

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